第 154 期 為什么液相色譜流動(dòng)相常用的是甲醇和乙腈

相信經(jīng)常使用液相的老師們，應(yīng)該每天都在跟甲醇和乙腈打交道吧。但是您知道，為什么液相色譜流動(dòng)相最常用的是甲醇和乙腈嗎？

當(dāng)然，液相色譜的流動(dòng)相還有水、以及添加的一些酸、堿或者緩沖鹽。但是我們今天只討論有機(jī)相這個(gè)部分。

要回答這個(gè)問題，那就得要了解一下液相色譜對于溶劑的一般要求是什么。

一、溶解度

首先，被分析的樣品在流動(dòng)相中必須對有一定的溶解度，如果樣品在流動(dòng)相中不溶解，那么即使你使用了其他溶劑將樣品溶解，但只要樣品一進(jìn)入液相系統(tǒng)，接觸到流動(dòng)相，就有可能會(huì)析出，堵塞系統(tǒng)，加大了進(jìn)行分析的難度。

絕大多數(shù)時(shí)候，都建議采用流動(dòng)相來溶解和稀釋樣品。如果用來稀釋樣品的溶劑跟流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度差距比較大的時(shí)候，就可能造成樣品出峰拖尾的現(xiàn)象，我們把這個(gè)現(xiàn)象叫做液相色譜的“溶劑效應(yīng)”。

溶劑效應(yīng)也叫做“溶劑化作用”。是指液相反應(yīng)中，溶劑的物理和化學(xué)性質(zhì)影響反應(yīng)平衡和反應(yīng)速度的效應(yīng)?？赡茉斐缮V峰展寬、分叉、保留時(shí)間漂移、峰面積變化，雙峰等現(xiàn)象。與此同時(shí)，較早洗脫的峰出現(xiàn)前沿或分叉，較晚洗脫的峰峰形正常。

二、腐蝕性

其次，流動(dòng)相溶劑不能對液相系統(tǒng)有腐蝕性。

液相系統(tǒng)中與流動(dòng)相接觸的管路大多數(shù)情況下都是不銹鋼的，它具有很強(qiáng)的抗腐蝕性。但是有些溶劑對于不銹鋼卻有很強(qiáng)的腐蝕性，比如氯仿，以及可能含有過氧化物色譜級(jí)醚等等。

有些時(shí)候，我們也會(huì)使用PEEK材質(zhì)的管路和接頭，因?yàn)樗鼈儼惭b拆卸起來比較方便。雖然PEEK材質(zhì)也有很好的化學(xué)惰性，但是長期使用二甲基亞砜、二氯甲烷及四氫呋喃等溶劑的時(shí)候，也會(huì)出現(xiàn)變脆和破裂的情況。

三、紫外吸收

另外，液相流動(dòng)相溶劑對于紫外線是應(yīng)該是透明的。因?yàn)橐合嗌V中的大多數(shù)樣品的檢測，都是使用紫外檢測器來進(jìn)行的，這樣就不會(huì)對我們要檢測的樣品產(chǎn)生干擾。

但是對于低于 220nm 的低紫外波長的檢測，這可能是個(gè)問題，因?yàn)楹茈y找到完全透明的溶劑。

如果在你選取的檢測波長下，使用的流動(dòng)相溶劑有著一定的紫外吸收，也就是說它不是完全透明的，那么，檢測的特異性就不那么強(qiáng)了，樣品定量結(jié)果的線性也會(huì)受影響。

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當(dāng)然，如果使用的是梯度洗脫的條件，那么最直接的現(xiàn)象就是基線的漂移了。

從這個(gè)角度來看，使用乙腈是更加優(yōu)于甲醇的。因?yàn)橐译娴淖贤饨刂共ㄩL是190nm，而甲醇是205nm。在低波長的檢測中，乙腈可以提供更加平穩(wěn)的基線和更好的定量結(jié)果。

四、低粘度

此外，流動(dòng)相溶劑應(yīng)該是低粘度的。

如果流動(dòng)相粘度比較高，同樣的流速條件下，對系統(tǒng)產(chǎn)生的壓力就更高。在越來越追求快速分析的今天，液相系統(tǒng)所能提供的最高壓力已經(jīng)是液相的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)之一了。

所以粘度越低的流動(dòng)相，對系統(tǒng)的壓力要求越低，也就更適合快速高效的液相分析。

從這方面來看，乙腈也要比甲醇好。甲醇與水混合的時(shí)候，粘性會(huì)變得更高。使用過甲醇和水走過梯度方法的老師肯定能直觀地感受到這一點(diǎn)。

綜合以上的液相色譜對于流動(dòng)相溶劑的要求，甲醇和乙腈就脫穎而出，成為了液相色譜最最常用有溶劑了。
????當(dāng)然，在做GPC分析的時(shí)候，我們還會(huì)用到四氫呋喃（THF）。在做正相分析的時(shí)候，也會(huì)用到正己烷和異丙醇。

五、不易燃且低毒性

在理想情況下，流動(dòng)相溶劑還應(yīng)該是不易燃且低毒性的。前面一點(diǎn)是從實(shí)驗(yàn)室的安全性來講，而后一點(diǎn)是對于液相色譜使用人員的健康保障的角度來看的。

而在這個(gè)方面，雖然甲醇和乙腈應(yīng)該都算是毒性較低的溶劑，但是相比起來，還是乙腈的毒性更大一些，而且可以透過皮膚吸收。所以從操作人員健康保障的角度來看，甲醇更為安全。